生物安全柜是一種在微生物學、生物、基因重組、動物實驗、生物制品等領(lǐng)域的科研、教學、檢驗和生產(chǎn)中廣泛使用的安全設(shè)備，也是實驗室生物安全中防護屏障中基本的安全防護設(shè)備。生物安全柜是一種負壓的凈化工作臺，正確操作生物安全柜，能夠保護工作人員、受試樣品并防止交叉污染的發(fā)生；而凈工作臺只是保護操作對象而不保護工作人員和實驗室環(huán)境的潔凈工作臺。因此，在微生物學和生物的科研、教學、檢驗和生產(chǎn)中，應(yīng)該選擇和使用生物安全柜，而不能夠選擇和使用凈工作臺。

　　生物安全柜與凈工作臺有何區(qū)別？

　　凈工作臺（LAMINAR FLOW CABINET） （Clean Benches） ，為了保護實驗材料而設(shè)計的，通過風機將空氣吸入預(yù)過濾器，經(jīng)由靜壓箱進入過濾器過濾，將過濾后的空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域達到百級潔凈度，保證生產(chǎn)對環(huán)境潔凈度的要求。只能保護樣品，不保護操作人員。從潔凈看，生物安全柜也比凈工作臺。凈工作臺的優(yōu)點是操作方便自如，比較舒適，工作效率高，預(yù)備時間短，開機１０分鐘以上即可操作，基本上可隨時使用。

　　生物安全柜與凈工作臺有何區(qū)別？

　　生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的，《實驗室生物安全手冊》提出，生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。生物安全柜同時也能保護工作環(huán)境。事實上，生物安全柜更側(cè)重于保護操作人員和環(huán)境，防止操作的病原微生物擴散造成人員傷害和環(huán)境污染。

　　根據(jù)生物安全防護水平的差異，生物安全柜可分為、二級和三級三種類型。生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。其氣流原理和實驗室通風櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器，將外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散造成污染。生物安全柜本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由于不能保護柜內(nèi)產(chǎn)品，目前已較少使用。二級生物安全柜是目前應(yīng)用為廣泛的柜型。按照《中華人民共和國藥行業(yè)標準YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定，二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個：A1型，A2型，B1型和B2型。所有的二級生物安全柜都可工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。

　　A1型安全柜前窗氣流速度小量或測量平均值應(yīng)少為0.38m/s。無內(nèi)部循環(huán)氣流，的氣體通過排氣口過濾排出。

　　A2型安全柜前窗氣流速度小量或測量平均值應(yīng)少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)工作區(qū)，30%的氣體通過排氣口過濾排出。

　　二級B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風機連接緊急供應(yīng)電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負壓，以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度小量或測量平均值應(yīng)少為0.5m/s(100fpm)。

　　B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)工作區(qū)。

　　B2型為全排型安全柜，無內(nèi)部循環(huán)氣流，可同時生物性和化學性的安全控制，可以操作揮發(fā)性化學品和揮發(fā)性核放射物作為添加劑的微生物實驗。

　　三級生物安全柜是為生物安全防護等級為4級實驗室而設(shè)計的，柜體氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗，如進行SARS、埃博拉病毒相關(guān)實驗等，根據(jù)生物安全柜的強制性行業(yè)標準《中華人民共和國藥行業(yè)標準YY0569-2005生物安全柜》規(guī)定，只有獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的三類器械注冊證的產(chǎn)品才能真正保護操作人員、實驗室環(huán)境和操作樣本。

　　凈臺的優(yōu)點是操作方便自如，比較舒適，工作效率高，預(yù)備時間短，開機10分鐘以上即可操作，基本上可隨時使用。在工廠化生產(chǎn)中，接種工作量很大，需要經(jīng)常地工作時，凈臺是很理想的設(shè)備。凈臺由三相電機作鼓風動力，功率145～260W左右，將空氣通過由特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“級濾清器”后吹送出來，形成連續(xù)不斷的無塵無菌的凈空氣層流，即所謂“的特殊空氣”，它除去了大于0.3μm的塵埃、真菌和細菌孢子等等。凈空氣的流速為24～30m/min，這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染，這樣的流速也不會妨礙采用酒精燈或本生燈對器械等的灼燒消毒。工作人員就在這樣的無菌條件下操作，保持無菌材料在轉(zhuǎn)移接種過程中不受污染。但是萬一操作中途遇到停電，暴露在未過濾空氣中的材料便難以幸免污染。這時應(yīng)迅速結(jié)束工作，并在瓶上作出記號，內(nèi)中的材料如處于增殖階段，則以后不再用作增殖而轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)。如為一般性生產(chǎn)材料，因其豐富也可棄去。如處于生根過程，則可留待以后種植用。

　　凈臺電源多采用三相四線制，其中有一零線，連通機器外殼，應(yīng)接牢在地線上，另外三線都是相線，工作電壓是380V。三線接入電路中有一定的順序，如線頭接錯了，風機會反轉(zhuǎn)，這時聲音正常或稍不正常，凈臺正面無風(可用酒精燈火焰觀察動靜，不宜久試)，應(yīng)及時切斷電源，只要將其中任何兩相的線頭交換一下位置再接上，就可解決。三相線如只接入兩相，或三相中有一相接觸，則機器聲音很不正常，應(yīng)立即切斷電源仔細檢修，否則會燒毀電機。這些常識應(yīng)在開始使用凈臺時就向工作人員講解清楚，免除不應(yīng)造成的事故與損失。

　　凈臺進風口在背面或正面的下方，金屬網(wǎng)罩內(nèi)有一普通泡沫塑料片或無紡布，用以阻攔大顆粒塵埃，應(yīng)常檢查、拆洗，如發(fā)現(xiàn)泡沫塑料老化，要及時更換。除進風口以外，如有漏氣孔隙，應(yīng)當堵嚴，如貼膠布，塞棉花，貼膠水紙等。工作臺正面的金屬網(wǎng)罩內(nèi)是級濾清器，級濾清器也可更換，如因使用年久，塵粒堵塞，風速減小，不能保證無菌操作時，則可換上新的。凈臺使用壽命的長短與空氣的潔凈程度有關(guān)。在溫帶地區(qū)凈臺可在一般實驗室使用，然而在熱帶或亞熱帶地區(qū)，由于大氣中含有高量的花粉，或多粉塵的地區(qū)，凈臺則宜放在較好的有雙道門的室內(nèi)使用。任何情況下不應(yīng)將凈臺的進風罩對著開敞的門或窗，以免影響濾清器的使用壽命。

　　無菌室應(yīng)定期用70%酒精或0.5%苯酚噴霧降塵和消毒，用2%新潔爾滅抹拭臺面和用具(70%酒精也可)，用福爾馬林(40%甲醛)加少量高錳酸鉀定期密閉熏蒸，配合紫外線滅菌燈(每次開啟15分鐘以上)等等消毒滅菌手段，以使無菌室經(jīng)常保持高度的無菌狀態(tài)。接種箱內(nèi)部也應(yīng)裝有紫外線燈，使用前開燈15分鐘以上照射滅菌，但凡是照射不到之處仍是有菌的。在紫外線燈開啟時間較長時，可激發(fā)空氣中的氧分子締合成臭氧分子，這種氣體成分有很強的殺菌作用，可以對紫外線沒有直接照到的角落產(chǎn)生滅菌效果。由于臭氧有礙健康，在進入操作之前應(yīng)先關(guān)掉紫外線燈，關(guān)后十多分鐘即可入內(nèi)。

　　在凈工作臺上亦可吊裝紫外線燈，但應(yīng)裝在照明燈罩之外，并錯開照明燈平行排列，這樣在工作時不妨礙照明。若將紫外線燈裝入照明燈罩(玻璃板)里面，這是毫無用處的，因為紫外線不能穿透玻璃，它的燈管是石英玻璃，而不是硅酸鹽玻璃制成的。接種室內(nèi)力求簡潔，凡與本室工作無直接關(guān)系的物品一律不能放入，以利保持無菌狀態(tài)。接種室內(nèi)的空氣與外界空氣應(yīng)隔絕，預(yù)留的通氣孔道應(yīng)盡量密閉。通氣孔道可設(shè)上下氣窗，氣窗面積宜稍大，需覆上4層紗布作簡單濾塵。在一天工作之后，可開窗充分換氣，然后再予以密閉。總之，既要清潔無塵無菌，又要空氣新鮮，適宜工作。覆在通氣窗上的紗布應(yīng)經(jīng)常換洗。但是上述種種措施只是理想的設(shè)計方案，往往不易做到，其實只要嚴格無菌操作手續(xù)，在門窗敞開的室內(nèi)，有一凈臺的保護，接種的污染率仍可控制在生產(chǎn)上可以容忍的水平。